2022年02期
1株假单胞菌oprD基因缺失和回补载体的构建
| 作 者 | 朱艳容，刘志新，杨靖，韩韵，陈果，徐祥 |
| 第一作者 | 朱艳容 |
| 作者单位 | 湖北医药学院基础医学院，湖北十堰 |
| 卷 号 | 50 |
| 发表年份 | 2022 |
| 发表刊期 | 2 |
| 发表页面 | 109-111,117 |
| 关 键 字 | 假单胞菌；毒力因子；基因敲除；基因回补 |
| 摘 要 | ［目的］构建假单胞菌毒性基因（oprD）缺失突变株，为进一步探讨其编码的毒力因子功能奠定基础。［方法］利用pEX18Gm质粒作为基因敲除的载体，构建假单胞菌oprD 基因重组自杀质粒，通过同源重组并激活自杀基因方式，筛选到目的基因缺失的突变株，再利用pBBR1MCS-2质粒作为目的基因回补的载体，构建回补载体。［结果］同源重组后，经过庆大霉素和氯霉素双抗平板、蔗糖平板筛选和PCR鉴定，成功获得了oprD基因缺失突变株，类似操作获得了回补菌株。［结论］基因缺失突变株的成功构建可为下一步的毒性机理研究奠定基础。 |
| 附 件 | 1株假单胞菌oprD基因缺失和回补载体的构建 |
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